Bioteknologi dan SEAMEO Biotrop

Bioteknologi merupakan cabang ilmu Biologi yang mempelajari teknologi pemanfaatan makhluk hidup dalam skala besar untuk menghasilkan produk yang memiliki nilai guna bagi manusia. Saat ini bioteknologi sudah berkembang dengan pesat. salah satu ruang lingkup bioteknologi adalah rekayasa genetika dan kultur jaringan. dalam bidang pertanian bioteknologi sangat bermanfaat, seperti menghasilkan benih dengan kualitas unggul,meningkatkan produktivitas tanaman dan menghasilkan tanaman yang tahan terhadap hama dan penyakit dan lain sebagiannya.

untuk belajar rekayasa genetika dan kultur jaringan kita bisa belajar di SEAMEO biotrop yang berlokasi di Jalan Raya Tajur Km. 6, Bogor.S EAMEO Biotrop menyediakan layanan berupa analisa laboratorium dan kultur jaringan, sedangkan ruang lingkup konsultasi meliputi ekosistem tropika dan dampak lingkungan, konservasi keanekaragaman hayati dan pembangunan berkelanjutan, bioteknologi hutan dan lingkungan, pengelolaan sumberdaya alam, sistem informasi geografis dan penginderaan jauh. 

berikut merupakan kegiatan pembuatan Media Kultur Jaringan dan Isolasi RNA pada tanaman di SEAMEO Biotrop

Pembuatan Media Kultur Jaringan

1.       Siapkan alat dan bahan dasar yang akan digunakan di laboratorium
a     Alat :  gelas beaker, neraca analitik, sendok, magnetic Stirrer, labu ukur, pipet tetes, gelas ukur, botol stock   
      Komposisi Medium Dasar Murashige dan Skoog 

Stok	gr/liter	gr/3lt
A	19	45
B	20	60
C	10	30
D	10	30
E	10	30
F	10	30
VITAMIN	2 ml	6 ml
MYOINOSITOL	0.1	0.3
GULA	25	75
AGAR	9	27

Pembuatan larutan stok B dan F

• Timbang larutan stok B menggunakan neraca analitik sebesar 60 gr/3 L aquades, kemudian homogenkan diatas magnetic stirrer. Setelah larutan homogen, maka masukkan ke dalam botol dan beri label.
• Timbang larutan stok F menggunakan neraca analitik sebesar 30gr/3 lt aquades, kemudian homogenkan diatas magnetic stirrer. Setelah larutan homogen maka masukkan ke dalam botol lalu beri label.

2.     kemudian  Tuang kurang lebih 200 mL akuades ke dalam labu Erlenmeyer

3.       Masing-masing bahan larutan A-F, vitamin, myoinositol dan sukrosa sesuai kebutuhan dimasukkan ke dalam Erlenmeyer. Untuk media induksi tunas dan perakaran tambahkan hormone tertentu

4.       Campuran media tersebut kemudian diaduk dengan magnetic stirrer hingga larut

5.       Pindahkan larutan media kultur jaringan ke labu takar, tambahkan aquades sampai tera 1 liter

6.       Selanjutnya tuangkan kembali larutan ke dalam Erlenmeyer

7.       Ukur pH media sesuai dengan kebutuhan (pH 5.6-5.8)

8.       Masukkan agar-agar kedalam campuran media

9.       Aduk hingga larutan homogeny

10.   Masak media hingga mendidih

11.   Tuang kedalam botol sterilisasi ke dalam autoclave selama 15 menit pada suhu 121 ⁰C

12.   Setelah diinkubasi minimum selama 2 hari, media siap digunakan.

Isolasi RNA pada tanaman

1.        Gunakan sampel (batang tanaman) kurang lebih 100 mg

2.        Haluskan sampel menggunakan mortar dan tambahkan nitrogen cair untuk memudahkan penghalusan sampel hingga menjadi tepung

3.       Inkubasi dengan suhu 60 ⁰C selama 2 menit

4.       Sentrifus 5000 rpm selama 2 menit

5.       Pindahkan ke filter column collection tube

6.       Sentrifus 5000 rpm dengan suhu 4 ⁰C selama 10 menit

7.       Tambahkan etanol absolut setengah dari volume larutan

8.       Homogenkan dengan pipetting

9.       Pindahkan larutan ke RB column

10.   Sentrifus 10.000 rpm dengan suhu 4 ⁰C selama 2 menit

11.   Buang larutan

12.   Tambahkan WI (Buffer) ke RB column

13.   Sentrifus 10.000 rpm dengan suhu 4 ⁰C selama 1 menit kemudian buang larutan

14.  Tambahkan wash buffer 600

15.   Sentrifus 10.000 rpm dengan suhu 4⁰C selama 1 menit kemudian buang larutan

16.  Tambahkan wash buffer 600

17.   Sentrifus 10.000 rpm dengan suhu 4 ⁰C selama 1 menit kemudian buang larutan

18.   Sentrifus 10.000 rpm dengan suhu 4 ⁰C selama 3 menit for drying

19.   pindahkan larutan ke RB column filter ke tube 1,5 ml

20.   tambahkan 12,5 RNAse free water ke RB filter

21.   inkubasi selama 2 menit RT

22.   centrifus 10.000 rpm dengan suhu 4 ⁰C selama 2 menit